ОКРАСКА ГЕМАТОКСИЛИНОМ — ЭОЗИНОМ
Окраска гематоксилин-эозином — наиболее распространённый метод окрашивания срезов. Этот методпозволяет установить отношения между частями органа, отлично выявляя все клеточные элементы и некоторые неклеточные структуры. Практически во всех случаях независимо от поставленной задачи применяется окраска гематоксилин-эозином. В большинстве случаев для изучения структуры нормального или измененного в результате болезни органа ограничиваются этим методом окраски. В других случаях, когда перед исследователем стоит специальная задача, пользуются особыми методами, окрашивая в то же время параллельно ряд срезов гематоксилин-эозином.
Эта окраска является двойной: гематоксилин — основной краситель — окрашивает ядра клеток, эозин — кислый краситель — красит протоплазму клеток и в меньшей степени — различные неклеточные структуры.
Гематоксилин представляет собой экстракт древесины кампешевого дерева, произрастающего в Америке. Эозин — искусственная краска. Растворы красителей должны быть приготовлены заранее. Гематоксилин сам по себе не является красящим веществом. Для того чтобы приготовить краску, гематоксилин подвергают окислению, в результате чего он превращается в красящее вещество — гематеин. В соединении с некоторыми солями гематеин дает четкое окрашивание ядер (используют гематоксилин Эрлиха, Майера, железный гематоксилин Гейденгайна).
Эозин — протоплазматический краситель; используется он в виде спиртовых или, гораздо чаще, водных растворов. Для приготовления эозина 0,1 г краски растворяют в 100 мл дистиллированной воды. Подготовка срезов к окраске заключается в их кратковременной обработке спиртом. Поскольку при заливке в парафин или целлоидин материал обезвоживается в спиртах, срезы, полученные при этих способах заливки, в особой подготовке для окраски гематоксилин-эозином не нуждаются. Обрабатывать необходимо замороженные срезы. При этом происходит их обезжиривание и другие изменения в структуре, что значительно улучшает окрашивание гематоксилин-эозином. Срезы обрабатывают в 96° спирте не более 3-5 минут. Из спирта срезы переносят обратно в дистиллированную воду. Окраску производят сначала гематоксилином.
Порядок проведения окраски:
| Дистиллированная вода | ополоснуть |
| Раствор гематоксилина | 1-20 мин |
| Солянокислый спирт | дифференцировка |
| Аммиачная вода | срезы синеют (контроль под микроскопом) |
| Проточная вода | 5-10 мин |
| Дистиллированная вода | ополоснуть |
| Раствор эозина | 10с-3 мин |
| Спирт 96%, карбол-ксилол, заключение |
Результат: ядра синие, цитоплазма и межклеточное вещество розовые.
Примеры практических микропрепаратов, окрашенных гематоксилином-эозином:
|
Рис. 1, 2. Болезнь Фара (феррокальциноз). В веществе головного мозга из зоны подкорковых ядер зональное обызвествление (практически без признаков склероза) стенок небольших сосудов (капилляров, мелких артерий и артериол) различной степени выраженности (от пылевидного включения солей кальция в толще стенки до полного замещения сосудистых стенок кальцинатами). Вдоль стенок большинства капилляров густо расположены небольшие округло-овальные кальцинаты по типу псаммом, вокруг отдельных капилляров образованы целые муфты петрификатов. |
|||||
|
Рис. 3, 4. Болезнь Фара (феррокальциноз, другое наблюдение). Крупные группы густо расположенных мелких сосудов с наличием циркулярного пылевидного и в виде мелких гранул кальциноза стенок, расположенного между адвентицией сосудов и средней их оболочкой, в толще средней оболочки, полностью замещающего сосудистую стенку. Видны фрагменты сосудистых стенок в косопоперечном, продольном срезе, утолщенные кальцифицированные стенки выглядят как «кусочки вермишели». |
|||||
|
Рис. 5. Очаговый интрамуральный кардиосклероз. Сохранившиеся кардиомиоциты в состоянии выраженной белковой зернистой дистрофии, выраженной гипертрофии. Окраска: гематоксилин-эозин. Увеличение х250. |
Рис. 6. Умеренная-выраженная гипертрофия кардиомиоцитов, белковая зернистая их дистрофия. В цитоплазме ряда кардиомиоцитов вокруг ядер расположены мелкие скопления золотисто-жёлтого «пигмента старения» липофусцина. Очаговая круглоклеточная инфильтрация стромы. Окраска: гематоксилин-эозин. Увеличение х250. |
||||
|
Рис. 7, 8. Грибковый перикардит (острый гнойно-фибринозный), группа гиалогифомикозов. Очаги выраженной лейкоцитарной инфильтрации с включениями относительно рыхлого фибрина на фоне очагово-диффузных диапедезно-деструктивных кровоизлияний расположены в эпикарде и субэпикардиальной жировой ткани. Здесь же расположены колонии грибковой микрофлоры, относящейся к гиалогифомикозам: хорошо окрашены гематоксилином-эозином, гифы в диаметре около 2-3 мкм, разрастаются пучками от центрального фокуса в виде «кустарника». Некоторые гифы дихотомично делятся. Мицелий септированный. |
|||||
|
Рис. 9, 10. Метастазы плоскоклеточного рака в миокард, субэпикардиальную жировую ткань. Увеличение х250. |
|||||
|
Рис. 11. Актиномикоз лёгкого с перифокальной картиной очаговой острой гнойной пневмонии. Окраска: гематоксилин и эозин. Увеличение х100. |
Рис. 12. Лёгочная миграция личинки аскариды. В просвете альвеолы червеобразная структура розового цвета, свёрнутая в клубок, с признаками её движения (тонкие перифокальные полоски просветления в реактивном гнойном экссудате). Окраска: гематоксилин и эозин. Увеличение х250. |
||||
|
Рис. 13-15. Грибковая (кандидозная) пневмония. Лёгочная ткань разрушена за счёт выраженного разрастания древовидного мицелия с перифокальной острой гнойно-фибринозной пневмонией. В отдельных полях зрения видны спорангии со спорами. Окраска: гематоксилин и эозин. Увеличение х250. Препараты предоставлены кафедрой судебной медицины Ижевской ГМА, Свердловским ОБСМЭ. |
|||||
|
Рис. 16, 17. Грибковая (кандидозная) пневмония. Лёгочная ткань разрушена за счёт выраженного разрастания мицелия с большим количеством спороносцев. Окраска: гематоксилин и эозин. Увеличение х100 и х250. |
|||||
|
Рис. 18. Криптококкоз лёгкого. Окраска: гематоксилин и эозин. Увеличение х100. |
Рис. 19. Криптококкоз печени. Окраска: гематоксилин и эозин. Увеличение х250. |
||||
|
Рис. 20, 21. Печень. Очаговое острое гнойное межуточное воспаление с преобладанием эозинофилов. Очаговое выраженное полнокровие синусоидных капилляров и центральных вен с эритростазами, диапедезными микрогеморрагиями. Гепатоциты в состоянии выраженной белковой зернистой дистрофии, мелко — и крупнокапельной жировой дистрофии. Часть печёночных клеток в состоянии некробиоза-некроза. Окраска: гематоксилин-эозин. Увеличение х250. |
|||||
|
Рис. 22. Выраженная очаговая гидропическая дистрофия гепатоцитов, сочетающаяся с мелко — и крупнокапельной жировой дистрофией печёночных клеток. Окраска: гематоксилин-эозин. | |||||
О Б О З Н А Ч Е Н И Я:
1-Гидропическая (вакуольная) дистрофия гепатоцитов
2-Баллонная дистрофия гепатоцитов
3-Воспалительная инфильтрация междольковой соединительной ткани
ЗАНЯТИЕ № 3
ТЕМА: Мезенхимальные дистрофии
№ 18 - АМИЛОИДОЗ ПЕЧЕНИ
Окраска: Конго красный
Балочное строение печени нарушено. Печеночные клетки и балки уменьшены в размерах, а местами вообще не определяются из-за отложения амилоидных масс, окрашенных в красно-оранжевый цвет. Амилоид откладывается в строме печени в стенках сосудов и желчных протоков
О Б О З Н А Ч Е Н И Я:
1-Отложения жира в строме миокарда
2-Атрофия мышечных волокон
№22 -ГИАЛИНОЗ АРТЕРИОЛ СЕЛЕЗЕНКИ
Окраска: гематоксилин-эозин
В препарате селезенки следует найти центральные артериолы фолликулов. Стенка артериол резко утолщена, гомогенизирована, бесструктурна, окрашена в розовый цвет. Просветы артериол сужены, а местами вообще не определяются.
О Б О З Н А Ч Е Н И Я:
1.Печеночные клетки с пигментом гемосидерином
2. Гемосидерин в строме печени
№ 94 -ДИСТРОФИЧЕСКОЕ ОБЫЗВЕСТВЛЕНИЕ МИОКАРДА
Окраска: гематоксилин-эозин
В препарате виден миокард, в котором имеются разной величины и формы очаги обызвествления, окрашенные в темно-фиолетовый цвет. Они представляют собой группы мышечных волокон, подвергшихся дистрофии и некрозу с последующим пропитыванием их солями кальция. Вокруг очагов обызвествления отмечается лейкоцитарная инфильтрация как результат реактивного воспаления.
О Б О З Н А Ч Е Н И Я:
1.Атрофия печеночных балок и клеток
2.Зерна липофусцина в печеночных клетках
ЗАНЯТИЕ № 5
ТЕМА: НЕКРОЗ. ОБЩАЯ СМЕРТЬ .
№ 4- ИШЕМИЧЕСКИЙ ИНФАРКТ СЕЛЕЗЕНКИ
Окраска: гематоксилин-эозин
В препарате можно различть три зоны:
первая зона – зона некроза -представлена участком бесструктурной массы (детритом), слабо окрашенным эозином в розовый цвет с наличием осколков ядер; вторая зона – демаркационная зона – характеризуется наличием расширенных сосудов с кровоизлияниями и слабо выраженной инфильтрацией нейтрофилами, что свидетельствует о «свежести» некроза; третья зона- не измененная ткань селезенки.
О Б О З Н А Ч Е Н И Я:
1- Клубочек с сохранившимися ядрами
2- Безъядерные извитые канальцы
3- Прямые канальцы с сохранившимися ядрами
4- Межуточное вещество с сохранившимися ядрами
№5 -ИНКАПСУЛИРОВАННЫЙ ОБЫЗВЕСТВЛЕННЫЙ ОЧАГ
ТВОРОЖИСТОГО НЕКРОЗА В ЛИМФОУЗЛЕ (при туберкулезе)
Окраска: гематоксилин-эозин
Строение лимфоузла нарушено, определяются сливающиеся очаги казеозного некроза, окрашенные эозином в розовый цвет. Кое-где в детрите выявляются осколки ядер, окрашенные гематоксилином в бледно-синий цвет. Вокруг некроза возникло продуктивное воспаление и формируется соединительнотканная капсула.
О Б О З Н А Ч Е Н И Я:
1-Очаги творожистого некроза
2- Зона демаркационного воспаления с образованием капсулы
ЗАНЯТИЕ № 6
ТЕМА: НАРУШЕНИЯ КРОВО- И ЛИМФООБРАЩЕНИЯ – 1 занятие.
(полнокровие, малокровие, кровотечение, кровоизлияния, плазморрагия, нарушения содержания тканевой жидкости, нарушения лимфообращения)
№ 1 - МУСКАТНАЯ ПЕЧЕНЬ
Окраска:гематоксилин-эозин
В препарате видна ткань печени. Балочное строение долек печени сохранено, однако центральные вены и впадающие в них синусоиды резко расширены, переполнены кровью. Синусоиды на периферии долек имеют обычный вид. Гепатоциты в центре долек резко уменьшены в размерах, атрофированы, а местами не определяются. Гепатоциты на периферии долек сохранены, местами с дистрофическими изменениями.
О Б О З Н А Ч Е Н И Я:
1- Расширенные и полнокровные центральные вены
2- Расширенные и полнокровные синусоиды центральных отделов долек
3- Атрофия и некроз печеночных клеток в центре долек
4- Сохранившиеся гепатоциты периферических отделов долек
№ 2 -БУРАЯ ИНДУРАЦИЯ ЛЕГКОГО
Окраска: гематоксилин-эозин
В препарате видна ткань легкого с расширенными межальвеолярными перегородками и суженными просветами альвеол. Межальвеолярные перегородки расширены за счет разрастания в них соединительной ткани, а также за счет полнокровия кровеносных сосудов, вокруг которых можно видеть диапедезные кровоизлияния. В межальвеолярных перегородках и в просветах альвеол содержатся скопления макрофагов, поглотивших гемосидерин и называющихся гемосидерофагами (окрашиваются в коричневый цвет). В просветах альвеол можно видеть отечную жидкость, окрашенную эозином в слабо розовый цвет.
О Б О З Н А Ч Е Н И Я:
1-Утолщенные и склерозированные альвеолярные перегородки
2-Расширенные и переполненные кровью сосуды
3-Скопления гемосидерофагов
4-Отечная жидкость в альвеолах
Окраска: гематоксилин-эозин
О Б О З Н А Ч Е Н И Я:
1-Полнокровие сосудов легкого
2-Скопление отечной жидкости в полостях легочных альвеол
3-Раковые эмболы в просвете лимфатических сосудов
№81- ОБТУРИРУЮЩИЙ ТРОМБ С ОРГАНИЗАЦИЕЙ, КАНАЛИЗАЦИЕЙ
И ВАСКУЛЯРИЗАЦИЕЙ
Окраска: гематоксилин-эозин
В препарате - поперечный срез сосуда, просвет которого выполнен соединительной тканью, заместившей обтурирующий тромб и остатками тромба. Граница между интимой и соединительной тканью неразличима. Среди соединительной ткани видны множественные мелкие и единичные крупные каналы, выстланные эндотелием (это вновь образованные сосуды).
О Б О З Н А Ч Е Н И Я:
1-Зона некроза
2-Зона демаркационного воспаления
3. Неизмененная ткань почки:
№ 8 -КРАСНЫЙ ТРОМБ В АРТЕРИИ ГОЛОВНОГО МОЗГА
Окраска: гематоксилин-эозин
Просвет артерии заполнен гомогенными эозинофильными массами - красным тромбом
О Б О З Н А Ч Е Н И Я:
1-Миокард
2-Фибрин на поверхности эпикарда
3-Грануляционная ткань, врастающая в фибрин.
№ 42 - ГНОЙНЫЙ МЕНИНГИТ
Окраска: гематоксилин-эозин
Мягкие мозговые оболочки резко утолщены преимущественно за счет инфильтрации гнойным экссудатом, состоящим из множества нейтрофильных лейкоцитов. Сосуды оболочек резко расширены, полнокровны. Ткань головного мозга существенно не изменена.
О Б О З Н А Ч Е Н И Я:
1-Гнойный экссудат в мозговых оболочках
2-Полнокровные сосуды мозговых оболочек
3-Ткань головного мозга
№ 104- СЕРОЗНО-ГНОЙНАЯ ПНЕВМОНИЯ
Окраска: гематоксилин-эозин
Просветы альвеол выполнены экссудатом различного состава. В одних -экссудат состоит из гомогенной белковой массы, однородно окрашенной эозином в розовый цвет, с небольшой примесью нейтрофильных лейкоцитов и клеток слущенного альвеолярного эпителия, что соответствует серозному воспалению. В других альвеолах в экссудате преобладают нейтрофильные лейкоциты, что характерно для гнойного воспаления. Наличие в одном и том же препарате фокусов серозного и гнойного воспаления позволяет назвать его серозно-гнойной пневмонией. В межальвеолярных перегородках определяются расширенные полнокровные сосуды и слабо выраженная лейкоцитарная инфильтрация.
О Б О З Н А Ч Е Н И Я:
1-серозный экссудат в просвете альвеол
2-гнойный экссудат в просвете альвеол
ЗАНЯТИЕ № 9
ТЕМА: Продуктивное воспаление
№ 52- МИЛИАРНЫЙ ТУБЕРКУЛЕЗ ЛЕГКИХ
Окраска: гематоксилин-эозин
В легочной ткани обнаруживаются множественные гранулемы, состоящие преимущественно из эпителиоидных клеток. В некоторых гранулемах определяются одна-две гигантские многоядерные клетки Пирогова-Лангханса с характерным расположением ядер в виде частокола по периферии клетки. В периферических отделах бугорка обнаруживается вал из лимфоцитов с небольшой примесью плазматических клеток. В некоторых бугорках обнаруживаются фокусы творожистого некроза.
О Б О З Н А Ч Е Н И Я:
2-Обызвествленная соединительнотканная капсула
3-Реактивное воспаление вокруг пораженного мышечного волокна
№ 56- ЦИСТИЦЕРКОЗ ГОЛОВНОГО МОЗГА(ветвистая форма)
Окраска: гематоксилин-эозин
О Б О З Н А Ч Е Н И Я:
1 – Плазматические клетки
2 –Клетки Микулича
3 –Гиалиновые шары
ЗАНЯТИЕ № 10
ТЕМА: Процессы компенсации и адаптации
№ 55- ЖЕЛЕЗИСТАЯ ГИПЕРПЛАЗИЯ ЭНДОМЕТРИЯ
Окраска: гематоксилин-эозин
В препарате представлен соскоб эндометрия. Эндометрий резко утолщен в связи с наличием большого количества маточных желез (крипт) отличающихся большим разнообразием по величине и форме. Однако все железы выстланы однослойным призматическим эпителием. Строма эндометрия сочная, отечная, местами инфильтрирована лейкоцитами.
О Б О З Н А Ч Е Н И Я:
1-Резкое утолщенные мышечные волокна
2-Увеличенные в размерах мышечные ядра
№ 109- ГИПЕРТРОФИЯ ЩИТОВИДНОЙ ЖЕЛЕЗЫ (коллоидный зоб)
Окраска: гематоксилин-эозин
Фолликулы щитовидной железы различной формы, многие из них резко увеличены в размере, заполнены коллоидом. Эпителиальные клетки фолликулов уплощены.
О Б О З Н А Ч Е Н И Я:
1- сосочковые разрастания, покрытые эпителием
№ 67- АДЕНОКАРЦИНОМА ТОЛСТОЙ КИШКИ
Окраска: гематоксилин-эозин
В препарате виден фрагмент стенки толстой кишки, в одном участке которого стенка кишки имеет обычное строение. В другом участке определяется опухоль, представленная атипичными эпителиальными клетками, формирующими атипичные железы. Опухоль инвазирует подслизистый и мышечный слои стенки кишки.
О Б О З Н А Ч Е Н И Я:
1- Гнезда раковых клеток
2-Раковые жемчужины (центры ороговения)
№ 64- СКИРР ГРУДНОЙ ЖЕЛЕЗЫ
Окраска: гематоксилин-эозин
Опухоль представлена мелкими группами или скоплениями атипичных гиперхромных малодифференцированных раковых клеток, расположенных среди широких прослоек зрелой волокнистой гиалинизированной соединительной ткани. Таким образом, в опухоли строма преобладает над паренхимой.
О Б О З Н А Ч Е Н И Я:
1- Гнезда опухолевых клеток
2-Гиалинизированная строма опухоли
ЗАНЯТИЕ № 12
ТЕМА: Эпителиальные опухоли органоспецифические
№ 80 -ХОРИОНЭПИТЕЛИОМА
Окраска: гематоксилин-эозин
В препарате представлена ткань матки. В миометрии разрастается опухолевая ткань, построенная из двух видов клеток: 1) клеток округлой и полигональной формы со светлой цитоплазмой и рыхлым, окрашенным в сиреневый цвет ядром (это клетки цитотрофобласта, клетки Лангханса), 2) крупных, уродливой формы клеточных симпластов с интенсивно окра-шенными множественными ядрами. Эти клетки образуют синтиций и называются синтициальными клетками. Описанные два вида клеток имеют сходство с хориальным эпителием ворсин, который является источником развития опухоли. Между клетками опухоли имеются кровяные лакуны, или «озера». Собственная строма в опухоли отсутствует.
О Б О З Н А Ч Е Н И Я:
1 - Крупные полигональные клетки, формирующие разной величины островки
2 - Узкие прослойки соединительной ткани, разделяющие клеточные островки опухоли
№ 15 -ФИБРОАДЕНОМА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ
Окраска: гематоксилин-эозин
Опухоль состоит из 2 компонентов: а) причудливо разрастающихся резко деформированных протоков с едва различимыми просветами; б) соединительной ткани. В одних участках опухоли соединительная ткань разрастается концентрически вокруг протоков и поэтому фиброаденома называется периканаликулярной, в других - соединительная ткань выпячивается в просвет протоков, их просвет становится щелевидным, что называется интраканаликулярной фиброаденомой.
О Б О З Н А Ч Е Н И Я:
1- опухолевые клетки, расположенные концентрически
2- псаммозные тельца
№ 108- НЕВРИНОМА (ШВАННОМА)
Окраска: гематоксилин-эозин
В препарате видна опухоль, построенная из клеток шванновской оболочки периферических нервных стволов. Она состоит из однородного цитоплазматического синтиция с наличием палочковидных ядер, образующих группы, в виде палисадных фигур - это полисадные структуры или тельца Верокаи.
О Б О З Н А Ч Е Н И Я:
1-Пучки гладкомышечных волокон
2-Пучки соединительнотканных волокон
ЗАНЯТИЕ № 14
ТЕМА: Опухоли кроветворной и лимфатической тканей
№ 32 -ЛИМФОГРАНУЛЕМАТОЗ
Окраска: гематоксилин-эозин
Строение лимфоузла резко изменено. В нем разрастается опухолевая ткань, состоящая из многоядерных клеток Березовского-Штернберга-Рид, больших и малых клеток Ходжкина. Определяются также эозинофилы, а количество лимфоидных клеток резко уменьшено. Кроме этого отмечаются склероз и очаги некроза опухоли.
О Б О З Н А Ч Е Н И Я:
1-Дольки печени
2-Скопления лейкозных клеток по периферии долек (лимфомы)
№141- ПЕЧЕНЬ ПРИ ХРОНИЧЕСКОМ МИЕЛОИДНОМ ЛЕЙКОЗЕ
Окраска: гематоксилин-эозин
По ходу синусоидов внутри печеночных долек и в меньшей степени в портальных трактах отмечается диффузное разрастание лейкозных клеток миелоидного ряда.
О Б О З Н А Ч Е Н И Я:
1. Диффузная лейкозная инфильтрация
ЗАНЯТИЕ № 15
ТЕМА: Атеросклероз. Артериальная гипертензия. Ишемическая болезнь сердца. Сосудистые заболевания нервной системы.
№ 8- ДИАПЕДЕЗНЫЕ КРОВОИЗЛИЯНИЯ В ГОЛОВНОМ МОЗГЕ
Окраска: гематоксилин-эозин
В ткани головного мозга видны мелкие и более крупные кровоизлияния, которые расположены преимущественно вокруг расширенных и резко полнокровных сосудов. Стенки сосудов местами неразличимы вследствие обильного пропитывания их эритроцитами. Кое-где можно видеть глыбки бурого пигмента гемосидерина, свидетельствующие о начале рассасывания ранее излившихся кровяных масс.
О Б О З Н А Ч Е Н И Я:
1- Некротизированные мышечные волокна, лишенные ядер
2- Клеточная инфильтрация и очаги кровоизлияний
3- Нормальная мышечная ткань
№ 130- АТЕРОСКЛЕРОТИЧЕСКАЯ БЛЯШКА КОРОНАРНОЙ АРТЕРИИ
Окраска: пикрофуксином по Ван-Гизон
Просвет артерии резко сужен в связи с резким диффузным утолщением стенки за счет отложения липоидных масс с последующим разрастанием в ней соединительной ткани. Внутренняя эластическая мембрана оттеснена к средней оболочке.
О Б О З Н А Ч Е Н И Я:
1-Очаг дезорганизации
2-Тромботические массы
3-Воспалительная инфильтрация
4-Разрастание соединительной ткани.
№ 83- РЕВМАТИЧЕСКИЙ МИОКАРДИТ
Окраска: гематоксилин-эозин
В расширенных межмышечных прослойках вокруг сосудов видны гранулемы. Это клеточные инфильтраты, состоящие преимущественно из лимфоцитов, макрофагов, нейтрофилов и эозинофилов, а также – фибробластов.
О Б О З Н А Ч Е Н И Я:
1-разрастание опухоли - аденокарциномы
№ 93 - ХРОНИЧЕСКАЯ ЯЗВА ЖЕЛУДКА С ОБОСТРЕНИЕМ
Окраска: гематоксилин-эозин
В стенке желудка имеется глубокий дефект, захватывающий слизистую и подслизистую оболочки. В области дефекта один край слизистой оболочки подрыт, другой пологий. В дне дефекта определяются: а) фибринозно-гнойный экссудат, б) фибриноидный некроз, в) грануляционная ткань, г) соединительная ткань.
О Б О З Н А Ч Е Н И Я:
1- Обильная инфильтрация слоев стенки отростка лейкоцитами
2- Язвенные дефекты в слизистой отростка
№ 144- ОСТРЫЙ ПАНКРЕАТИТ
©2015-2019 сайт
Все права принадлежать их авторам. Данный сайт не претендует на авторства, а предоставляет бесплатное использование.
Дата создания страницы: 2016-08-07
Широкое применение гематоксилина в микроскопической технике обусловлено его замечательными свойствами как красителя растительного происхождения. Уникальность происхождения и отличительные природные свойства позволяют говорить о незаменимости свойств этого продукта в научных исследованиях и лабораторной диагностике.
Гематоксилин - краситель растительного происхождения, который содержится вформе гликозида в соке кампешевого дерева (Haematoxylon campechianum), произрастающего в Индии и Америке. Родиной же этого дерева является Южная Мексика, область Кампече.Кампешевый экстракт, содержащий гематоксилин, изначально применялся для окраски тканей в текстильной промышленности. В качестве гистологического красителя гематоксилин стал применяться с середины XIX века. Гематоксилин, введенный в микротехнику Вальдейером в 1882 году, положил начало разработке ценнейших методов окраски. Первый рецепт квасцового гематоксилина был предложен Бемером в 1865 году. И в XX веке стал главным красителем, применяемым для окраски ядер клеток.
Химические свойства гематоксилина
Гематоксилин представляет собой бесцветные или слабо окрашенные кристаллы сладкого вкуса, приобретающие под действием света, а также на воздухе красновато-желтую окраску. Гематоксилин малорастворим в холодной воде, но растворим в воде горячей (особенно в присутствии буры), этиловом спирте, глицерине, плохо растворим в диэтиловом эфире. Со щелочами дает растворы пурпурного цвета, который быстро переходит в синевато-фиолетовый, а затем в коричневый. Разбавленные кислоты на гематоксилин не действуют. Обладает свойствами кислотно-основного индикатора. Брутто-формула гематоксилинаС16Н14О6 CAS 517-28-2, а наиболее часто встречающиеся синонимы: Haematoxylin, Hematoxylin, Natural Black 1, C .I. 75290, гидроксибразилин, оксибразилин.
Применение
Сам по себе гематоксилин не представляет пигмента, но при окислении гематоксилина чрезвычайно легко образует пигмент гематеин, который в свою очередь дает различные продукты более глубокого окисления, неприменимые для окрашивания. Все рецепты приготовления гематоксилина для окрашивания препаратов имеют своей целью превращение гематоксилина в гематеин. Но ни гематоксилин, ни гематеин не способны давать окрашивание без протрав, с которыми они образуют солеобразные соединения - лаки. В качестве протрав используют соли алюминия, железа, меди, хрома, молибдена, ванадия. Самыми распространенными протравами являются соединения алюминия (в виде алюмоаммонийных или алюмокалиевых квасцов) или железа (хлорид железа или железоаммонийный квасцы). Другие протравы используются гораздо реже и включают хромовые квасцы и фосфорновольфрамовую кислоту.
Гематоксилин
Гематеин
Растворы гематоксилина
Существуют многочисленные способы приготовления красящих растворов из гематоксилина, хотя суть всех этих методов заключается в одном - его окислении.
Методы с железным гематоксилином
Существуют два метода окрашивания железным гематоксилином - регрессивный и прогрессивный. Первый основан на избыточном окрашивании и последующей дифференцировке путем отмывания в соответствующей жидкости; при этом соли железа вводят в раствор красителя либо обрабатывают ими срезы перед окрашиванием. Жидкость, служащая для дифференцировки, после окончания процедуры должна быть тщательно отмыта. Если она не отмыта, то продолжает действовать после достижения желательной степени дифференцировки и может испортить окраску.
В прогрессивном методе используют кислые растворы или избыток солей железа, что позволяет избежать переокрашивания.
К методам окрашивания с железным гематоксилином обычно относят:
· Железный гематоксилин Брусси.
· Железный гематоксилин Вейгерта.
· Железный гематоксилин по Ясвоину.
· Железный гематоксилин по Рего.
· Железный триоксигематеин по Ганзену.
· Окраска хлористожелезным гематоксилином по Геквисту.
Методы с квасцовыми гематоксилинами
Комплексы гематоксилина с солями алюминия обычно готовят, используя двойной сульфат аммония и алюминия или алюмо-аммониевые квасцы. Такие комплексы обычно называются квасцовым гематоксилином. Иногда вместо аммониевых используются калиевые или натриевые квасцы, причем результаты окрашивания не изменяются. Так как красящим началом является гематеин, а соли алюминия в отличие от солей трехвалентного железа не являются окислителями, растворы квасцового гематоксилина перед использованием необходимо окислить или дать им “вызреть”. Гематеин медленно образуется при пропускании пузырьков воздуха через растворы гематоксилина (для получения однородных результатов может понадобиться 3-4 недели), при выдерживании растворов в открытых сосудах в течение нескольких недель; гематеин образуется также в твердом красителе, хранящемся в открытом сосуде во влажной атмосфере. Большинство химических окислителей, таких, как перекиси, иодаты, перманганаты, перхлораты, окись ртути и соли трехвалентного железа, окисляют гематоксилин сразу, хотя некоторые из них действуют при нагревании.
Избирательность окраски ядер квасцовым гематоксилином возрастает в присутствии избытка солей алюминия или еще в кислых растворах.
К методам окрашивания с квасцовыми гематоксилинами обычно относят:
· Кислый гемалаун Майера.
· Двойная окраска гемалаун-эозином.
· Квасцовый гематоксилин но Эрлиху.
· Окраска гематоксилином Делафильда.
· Окраска квасцовым гематоксилином по Ганзену.
· Квасцовый гематоксилин по Карацци.
Также широкое распространение получили следующие методы:
· Методика окраски срезов с дифференцировкой
· Методика окраски гематоксилин-эозином на предметном стекле.
· Методика проведения окраски парафиновых срезов гематоксилин-эозином по методу Бемера.
· Методика окраски гематоксилин-эозином
Более подробно о вышеперечисленных методах можно прочитать .
Неоднократно предпринимались попытки отыскать более дешевую и удобную замену гематоксилину для применения в микроскопической технике. Предлагали использовать такие природные красители, как сок черники, черной смородины, синтетические красители (антоциан ВВ, феноцианин ТС, галлеин, бразилин, ализариновый синий S, целестиновый синий). Однако ни один из данных заменителей в настоящее время не смог полностью заменить гематоксилин. Во многом поэтому, на сегодняшний день, гематоксилин незаменим в научных исследованиях и лабораторной диагностике.
По материалам статьи Горбуновой Т.К.
«Электронный математический и медико-биологический журнал» . - Т. 7. - Вып. 1. - 2008.
Гистологический образец лёгочной ткани человека, окрашенный гематоксилин-эозином.
Окраска гематоксилином и эозином (окраска гематоксилин-эозином) - один из самых распространённых методов окраски в гистологии . Широко используется в медицинской диагностике, в частности в онкологии для окраски ткани, полученной при биопсии .
Окраска включает использование основного красителя гематоксилина , окрашивающего базофильные клеточные структуры ярко-синим цветом, и спиртового кислого красителя эозина Y , окрашивающего эозинофильные структуры клетки красно-розовым цветом. Базофильные структуры, как правило, это те, которые содержат нуклеиновые кислоты (ДНК и РНК): клеточное ядро , рибосомы и РНК-богатые участки цитоплазмы . Эозинофильные структуры содержат внутри- и внеклеточные белки , например, тельца Леви . Цитоплазма является эозинофильной средой. Эритроциты всегда прокрашиваются ярко-красным цветом.
Техника окраски гематоксилин-эозином
- Удаляют парафин из срезов в орто-ксилоле или толуоле , проводят по спиртам нисходящей концентрации и доводят до воды (две порции ксилола или толуола – 3-5 минут, 96° этанол – 3 минуты, 80° этанол – 3 минуты, 70° этанол – 3 минуты, дистиллированная вода – 5 минут).
- Окрашивают гематоксилином 7-10 минут (в зависимости от зрелости красителя).
- Промывают в дистиллированной воде – 5 минут.
- Дифференцируют в 1% соляной кислоты на 70° этаноле до побурения срезов.
- Промывают дистиллированной водой, а затем слабым (0,5 %) раствором аммиака до посинения срезов.
- Окрашивают водным раствором эозина 0,5-1 минуту (в зависимости от желаемой окраски).
- Промывают в трех порциях дистиллированной воды для удаления избытка эозина.
- Удаляют воду из срезов в одной порции 70° этанола, двух порциях 96° этанола. Экспозиция в каждой порции спирта – 2 минуты.
- Просветляют срезы в двух порциях карбол-ксилола (смесь расплавленного фенола и ксилола либо толуола в соотношении 1:4 или 1:5) – 1 минута.
- Производят окончательное обезвоживание срезов в двух порциях ксилола или толуола. Прибывание срезов 2 минуты.
- Заключить срезы в канадский бальзам или синтетическую среду для заключения гистологических срезов.
Некоторые структуры плохо прокрашиваются гематоксилином и эозином (как правило гидрофобные) и требуют иных методов окраски. Например, участки клеток, богатые липидами и миелином, остаются неокрашенными: адипоциты , миелиновая оболочка аксонов нейронов , мембрана аппарата Гольджи и др.
См. также
Ссылки
- Rosen Lab, Department of Molecular and Cellular Biology, Baylor College of Medicine) Step by step protocol
Wikimedia Foundation . 2010 .
Смотреть что такое "Окраска гематоксилином и эозином" в других словарях:
Гистологический образец лёгочной ткани человека, окрашенный гематоксилин эозином. Окраска гематоксилин эозин (окраска гематоксилином и эозином) является одним из самых распространённых методов гистологии. Широко используется в медицинской… … Википедия
Туберкулез органов дыхания. Органы дыхания при туберкулезе (Туберкулёз органов дыхания) поражаются наиболее часто. В соответствии с принятой в нашей стране клинической классификацией туберкулеза различают следующие формы Т. о. д.: первичный… … Медицинская энциклопедия
I Сердце Сердце (лат. соr, греч. cardia) полый фиброзно мышечный орган, который, функционируя как насос, обеспечивает движение крови а системе кровообращения. Анатомия Сердце находится в переднем средостении (Средостение) в Перикарде между… … Медицинская энциклопедия
- (leucoscs; греч. leukos белый + ōsis; синоним лейкемия) заболевания опухолевой природы, протекающие с вытеснением нормальных ростков кроветворения: опухоль возникает из кроветворных клеток костного мозга. Заболеваемость Л. неодинакова в различных … Медицинская энциклопедия
I Пневмония (pneumonia; греч. pneumon легкое) инфекционное воспаление легочной ткани, поражающее все структуры легких с обязательным вовлечением альвеол. Неинфекционные воспалительные процессы в легочной ткани, возникающие под влиянием вредных… … Медицинская энциклопедия
Туберкулез внелегочный условное понятие, объединяющее формы туберкулеза любой локализации, кроме легких и других органов дыхания. В соответствии с клинической классификацией туберкулеза (Туберкулёз), принятой в нашей стране, к Т. в. относят… … Медицинская энциклопедия
I Плацента (лат. placenta лепешка; синоним детское место) развивающийся в полости матки во время беременности орган, осуществляющий связь между организмом матери и плодом. В плаценте происходят сложные биологические процессы, обеспечивающие… … Медицинская энциклопедия
I Забрюшинное пространство (spatium retroperitoneale; синоним ретроперитонеальное пространство) клетчаточное пространство, расположенное между задней частью париетальной брюшины и внутрибрюшной фасцией; простирается от диафрагмы до малого таза. В … Медицинская энциклопедия
I Матка Матка (uterus, metra) непарный мышечный полый орган, в котором происходят имплантация и развитие зародыша; расположен в полости малого таза женщины. Органогенез Развитие М. во внутриутробном периоде начинается при длине плода около 65 мм … Медицинская энциклопедия
I Мокрота (sputum) выделяемый при отхаркивании патологически измененный трахеобронхиальный секрет с примесью слюны и секрета слизистой оболочки носа и придаточных (околоносовых) пазух. В норме трахеобронхиальный секрет состоит из слизи,… … Медицинская энциклопедия
Окраска гематоксилин-эозин (окраска гематоксилином и эозином) является одним из самых распространённых методов гистологии. Широко используется в медицинской диагностики, в частности в онкологии для окраски ткани, полученной при биопсии.
Окраска включает использование основного красителя гематоксилина, окрашивающего базофильные клеточные структуры ярко-синим цветом, и спиртового кислого красителя эозина Y, окрашивающего эозинофильные структуры клетки красно-розовым цветом. Базофильные структуры, как правило, это те, которые содержат нуклеиновые кислоты (ДНК и РНК): клеточное ядро, рибосомы и РНК-богатые участки цитоплазмы. Эозинофильные структуры содержат внутри — и внеклеточные белки, например, тельца Леви. Цитоплазма является эозинофильной средой. Эритроциты всегда прокрашиваются ярко-красным цветом.
Таким образом, терминология базофильная и эозинофильная структура связана с аффинностью к соответствующим красителям и не связана с кислотностью среды.
Некоторые структуры плохо прокрашиваются гематоксилином и эозином (как правило гидрофобные) и требуют иных методов окраски. Например, участки клеток, богатые липидами и миелином остаются неокрашенными: адипоциты, миелиновая оболочка аксонов нейронов, мембрана аппарата Гольджи и др.
Wikimedia Foundation. 2010 .
Смотреть что такое «Окраска гематоксилин-эозин» в других словарях:
Гематоксилин - Общие Систематическое наименование цис (+) 7,11b дигидробенз[b]инденопиран 3,4,6a,9,10(6H) пентол Химическ … Википедия
Эозин Y - Общие Систематическое наименование 2 (2,4,5,7 тетрабромо 6 оксидо 3 окс … Википедия
ОКРАСКА - (микроорганизмов). Мазок на предметном или покровном стекле высушивается на воздухе; высушивание над пламенем не рекомендуется, допускается лишь помещение препарата вблизи пламени. Высушенный препарат фиксируется троекратным проведением через… … Большая медицинская энциклопедия
ВОСПАЛЕНИЕ - ВОСПАЛЕНИЕ. Содержание: Морфология и патологич. физиология В. . .626 Экспериментальное изучение В. 631 Причины В. 632 Характер В. 63 3 Сравнительная патология В. 636 Механизм развития… … Большая медицинская энциклопедия
Кожа - У этого термина существуют и другие значения, см. Кожа (значения). О коже как материале см. Кожевенное производство, Кожаные изделия, Художественная обработка кожи. Кожа наружный покров организма позвоночных, защищающий тело от широкого… … Википедия
ГИСТОЛОГИЧЕСКАЯ ТЕХНИКА
КРАСКИ - КРАСКИ, химич. вещества, обладающие свойством окрашивать другие предметы в свой или другой цвет непосредственно или с помощью другого хим. соединения протравы. Широкое применение К., надо полагать, вызывается инстинктивным стремле нием человека к … Большая медицинская энциклопедия
Окрашивание гематоксилином-эозином
Универсальный русско-английский словарь. Академик. ру. 2011 .
Смотреть что такое «окрашивание гематоксилином-эозином» в других словарях:
Окраска гематоксилином и эозином - Гистологический образец лёгочной ткани человека, окрашенный гематоксилин эозином. Окраска гематоксилином и эозином (окраска гематоксилин эозином) один из самых распространённых методов окраски в гистологии. Широко используется в м … Википедия
Краситель Романовского - сочетает в своем составе эозинат (химически восстановленный эозин) и метиленовый синий, иногда с продуктами окисления последнего азуром А и азуром Б. Краситель Романовского является прототипом ряда других красителей, которые применяют для… … Википедия
Методические подходы и методы исследования в анатомии человека - Иногда приходится слышать о том, что в анатомии уже ничего не осталось для изучения, исследования, якобы все темы исчерпаны, все, что можно было изучать, уже изучено, все вопросы решены. Как будто бы все, что касается строения тела человека,… … Словарь терминов и понятий по анатомии человека
Краситель Романовского - Райта - Краситель Романовского сочетает в своем составе эозинат (химически восстановленный эозина) и метиленовый синий, иногда с продуктами окисления последнего азуром А и азуром Б. Краситель Романовского является прототипом ряда других красителей,… … Википедия
Гистология - (от греч. ἱστός ткань и греч. λόγος знание, слово, наука) раздел биологии, изучающий строение тканей живых организмов. Обычно это делается рассечением тканей на тонкие слои и с помощью микротома. В отличие от анатомии,… … Википедия
КРОВЬ - КРОВЬ, жидкость, заполняющая артерии, вены и капиляры организма и состоящая из прозрачной бледножелтоват. цвета плаз мы и взвешенных в ней форменных элементов: красных кровяных телец, или эритроцитов, белых, или лейкоцитов, и кровяных бляшек, или … Большая медицинская энциклопедия
ГИСТОЛОГИЧЕСКАЯ ТЕХНИКА - ГИСТОЛОГИЧЕСКАЯ ТЕХНИКА. Содержание: Методика гистологич. исследований. 242 Теоретические основы Г. т. 246 Гистохимия. 253 Краски, употребляемые в Г. т. 258 Гистологическая техник а техника изучения… … Большая медицинская энциклопедия
ПЕЧЕНЬ - ПЕЧЕНЬ. Содержание: I. Аштомия печени. 526 II. Гистология печени. 542 III. Нормальная физиология печени. 548 IV. Патологическая физиология печени. 554 V. Патологическая анатомия печени. 565 VІ.… … Большая медицинская энциклопедия
Базофилия - Эту статью следует викифицировать. Пожалуйста, оформите её согласно правилам оформления статей. Базофилия (от др. греч … Википедия
Спермограмма - (от др. греч. σπέρμα семя и γράμμα запись) анализ эякулята (спермы), используемый в медицине для установления фертильности мужчины и выявления возможных заболеваний половой системы. Спермограмму назначают при жалобах супружеской … Википедия
Патологическая анатомия твёрдых тканей зуба - Патологические процессы в твёрдых тканях зуба традиционно подразделяются на две группы кариес и некариозные поражения. Содержание 1 Кариес (caries) 1.1 Этимология термина «кариес» … Википедия
Источники:
//dic. academic. ru/dic. nsf/ruwiki/666219
//universal_ru_en. academic. ru/1793413/%D0%BE%D0%BA%D1%80%D0%B0%D1%88%D0%B8%D0%B2%D0%B0%D0%BD%D0%B8%D0%B5_%D0%B3%D0%B5%D0%BC%D0%B0%D1%82%D0%BE%D0%BA%D1%81%D0%B8%D0%BB%D0%B8%D0%BD%D0%BE%D0%BC-%D1%8D%D0%BE%D0%B7%D0%B8%D0%BD%D0%BE%D0%BC
